伯樂（Bio-Rad）Mini-PROTEAN Tetra（貨號1658001）小型垂直電泳系統(tǒng)出現(xiàn)條帶“歪斜"（如條帶呈“/"或“\\"形、邊緣翹起，而非水平的“—"形），通常是電泳物理組裝或膠體聚合環(huán)節(jié)出了問題。請按以下優(yōu)先級排查：

一、玻璃板與膠墊密封不嚴(yán)（漏液）

1、現(xiàn)象：條帶整體向一側(cè)傾斜，且同一側(cè)的幾個(gè)泳道歪斜程度一致。

2、原因：制膠時(shí)，兩側(cè)的厚墊片（spacer）與玻璃板間有微小縫隙，導(dǎo)致凝膠聚合時(shí)濃縮膠與分離膠界面不平（一側(cè)高、一側(cè)低）。

3、解決：

（1）制膠前，確保兩塊玻璃板底部對齊，卡緊制膠架，底部密封墊無老化變形（如老化需更換，貨號1658038）。

（2）灌注分離膠后，立即用正丁醇或水封平，確保液面絕對水平。

（3）若已有歪斜膠，需重制，無法通過后續(xù)操作矯正。

二、電極芯（電極架）安裝問題

1、現(xiàn)象：條帶呈弧形（如“微笑"狀）或內(nèi)外側(cè)歪斜方向相反。

2、原因：內(nèi)槽電泳緩沖液泄漏，導(dǎo)致凝膠上下形成離子濃度差，電場不均。

3、解決：

（1）將電極芯單獨(dú)拿出，檢查底部密封圈是否完好。

（2）重新安裝電極芯時(shí)，傾斜插入并確保綠色密封墊卡入玻璃板與電極芯的凹槽。

（3）灌滿內(nèi)槽液后，靜置1分鐘觀察液面是否緩慢下降，若下降即漏液。

三、膠體聚合不均勻

1、現(xiàn)象：條帶在某泳道突然變窄或扭曲，甚至單個(gè)泳道內(nèi)部分辨率不均。

2、原因：TEMED或APS未混勻，局部聚合速度不同。

3、解決：配膠時(shí)渦旋震蕩10秒以上，加TEMED后立即混勻灌注。

四、樣品沉積不平

1、現(xiàn)象：所有條帶朝同一方向均勻傾斜，但傾斜角度隨電泳時(shí)間增大。

2、原因：電泳槽未放平。雖不常見于該機(jī)型（因其底部平），但若桌面或制冷槽不平仍會發(fā)生。

3、解決：用水平儀或目測放置平臺，可在電泳槽一角墊紙調(diào)平。

五、梳子（comb）插入或拔出不當(dāng)

1、現(xiàn)象：條帶邊緣模糊且有“拖尾"狀歪斜。

2、原因：梳齒未垂直、勻速拔出，或拔出前膠未凝固，造成加樣孔變形。

3、解決：膠凝固后（室溫下分離膠20-30分鐘），用去離子水或電泳緩沖液沖洗加樣孔，并觀察孔是否方正。

六、建議快速驗(yàn)證步驟

1、重制一塊膠，嚴(yán)格注意玻璃板對齊、密封、液面水平

操作：若新膠正常 → 原膠問題

2、換另一套電極芯（若有）或借用鄰臺同型號

操作：若歪斜消失 → 原電極芯漏液

3、不跑樣品僅跑染料（例如0.1%溴酚藍(lán)）

操作：觀察藍(lán)色條帶水平度，可排除樣品問題