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技術(shù)文章

BioRad伯樂(lè)1658001小型垂直電泳槽溫度失控怎么處理

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伯樂(lè) Mini-PROTEAN Tetra 小型垂直電泳槽(型號(hào)1658001) 出現(xiàn)“溫度失控"問(wèn)題(通常表現(xiàn)為緩沖液異常發(fā)熱、凝膠過(guò)熱變軟或變形、電泳過(guò)程中電流持續(xù)升高無(wú)穩(wěn)定平臺(tái)),需立即處理以避免損壞凝膠、影響結(jié)果,甚至造成電泳槽或電源的損壞。

下面是系統(tǒng)的排查與處理方法:


一、立即停止運(yùn)行,確保安全

1、立即斷開(kāi)電源,拔掉電泳槽上的電極線(xiàn)。

2、小心燙傷:如果緩沖液已過(guò)熱(手摸外殼感覺(jué)燙手),等冷卻后再操作。

3、檢查凝膠:觀察凝膠是否融化、變形或從玻璃板中擠出。


二、處理常見(jiàn)原因(操作參數(shù)與緩沖液)

溫度失控的本質(zhì)是產(chǎn)熱大于散熱。對(duì)于垂直電泳,以下幾點(diǎn)最常引發(fā)過(guò)熱:

1、電壓/電流設(shè)置過(guò)高

(1)Mini-PROTEAN Tetra 的常規(guī)推薦:

恒壓模式:120-200V(常用150V)。 不要超過(guò)200V。

恒流模式:20-40mA/塊膠。

(2)解決:降低電壓至150V以下,或改為恒流30mA。若仍過(guò)熱,繼續(xù)降低至100V。

2、緩沖液濃度錯(cuò)誤或離子強(qiáng)度錯(cuò)誤

(1)Tris-甘氨酸-SDS 緩沖液:1× 工作液應(yīng)正確稀釋?zhuān)?5mM Tris,192mM 甘氨酸,0.1% SDS)。若誤用5×或10×原液未稀釋?zhuān)x子強(qiáng)度高,電流巨大,瞬間升溫。

(2)緩沖液過(guò)期或變質(zhì):反復(fù)使用幾次后,緩沖液離子強(qiáng)度下降,電阻增加?實(shí)際上電阻增加會(huì)產(chǎn)熱更劇烈?不對(duì):根據(jù)焦耳定律 P=I2R,恒壓模式下功率P=V2/R,R增大則功率減小、產(chǎn)熱減少。但溫度失控常見(jiàn)于恒流模式:恒流下P=I2R,R增大則功率增大產(chǎn)熱增大。需要具體分析。

(3)簡(jiǎn)單檢查方法:重新配制新鮮的1×緩沖液,更換(不要復(fù)用)。

(4)解決:務(wù)必使用正確稀釋的1×工作液,pH應(yīng)在8.3左右。

3、緩沖液量不足

(1)內(nèi)槽(陽(yáng)極緩沖液)需淹沒(méi)玻璃板的底部(至少加滿(mǎn)到“MIN"線(xiàn))。外槽應(yīng)加至同一水平或稍高。

(2)液面過(guò)低時(shí),電極接觸不良或局部電阻集中,產(chǎn)生局部高溫。

(3)解決:補(bǔ)充預(yù)冷的緩沖液至規(guī)定刻度。


三、檢查電泳槽是否漏液或電極故障

1、內(nèi)槽漏液:

(1)Mini-PROTEAN Tetra 的核心密封靠的是玻璃板底部的密封墊和閘門(mén)夾。

(2)如果內(nèi)槽緩沖液緩慢漏入外槽,導(dǎo)致內(nèi)槽液面下降,露出的電極和凝膠底部會(huì)過(guò)熱。

(3)檢查方法:裝好玻璃板后,往內(nèi)槽加滿(mǎn)緩沖液,靜置5分鐘,觀察液面是否明顯下降。

(4)解決:重新組裝玻璃板,確保兩塊玻璃板下端對(duì)齊,并將橡膠密封墊貼合;或者更換密封條(部件號(hào)1653310)。

2、電極金屬絲斷裂或氧化:

(1)鉑金電極(正極、負(fù)極)若斷裂或局部斷開(kāi),會(huì)導(dǎo)致電流分布不均,局部電流密度過(guò)高引起過(guò)熱。

(2)解決:目測(cè)檢查電極絲是否完整、表面有無(wú)黑色氧化層。氧化層可用棉簽蘸稀鹽酸(或直接聯(lián)系售后)清潔。


四、改善散熱條件(關(guān)鍵)

Mini-PROTEAN Tetra 沒(méi)有內(nèi)置風(fēng)扇或半導(dǎo)體制冷,但可以通過(guò)外部方法顯著降溫:

1、加冰浴:將整個(gè)電泳槽放入一個(gè)更大的塑料盆中,周?chē)顫M(mǎn)冰水混合物,確保槽體外壁接觸冰水。注意不要讓冰水進(jìn)入電泳槽內(nèi)部污染緩沖液。

2、預(yù)冷緩沖液:將配制好的1×緩沖液提前放入4℃冰箱預(yù)冷,再使用。

3、在冷庫(kù)或冷藏室中運(yùn)行:環(huán)境溫度降低可有效緩解升溫。

4、使用磁力攪拌器:將電泳槽放在磁力攪拌臺(tái)上,放入小攪拌子,低速攪拌緩沖液,促進(jìn)熱交換。但注意避免攪拌子碰到電極。


五、排查電源及連接問(wèn)題

1、檢查電源是否工作異常(如直流輸出紋波過(guò)大,或用其他電泳槽測(cè)試電源是否正常)。

2、檢查電泳槽連接線(xiàn)是否接觸不良,導(dǎo)致瞬間高壓或電流尖峰。


六、總結(jié)處理流程(用戶(hù)可立即執(zhí)行)

1、斷電,冷卻后重新配新鮮1×緩沖液。

2、降低電壓到100V 試運(yùn)行15分鐘,用手觸摸緩沖液溫度是否明顯上升。

3、檢查內(nèi)槽液面并檢查有無(wú)漏液。

4、強(qiáng)制冷卻:在外圍加冰水浴,預(yù)冷緩沖液。

5、如果仍然過(guò)熱:使用另一臺(tái)電源或另取一個(gè)電泳槽(排除電源和槽體本身問(wèn)題)。

6、若以上均無(wú)效:聯(lián)系伯樂(lè)技術(shù)支持,可能是內(nèi)部電極絕緣老化或短路,需要維修。

TEL:18016231680

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