“Qubit Flex 儀器標準品錯誤"這個提示，通常表明儀器在校準過程中，檢測到的標準品熒光信號不在預期范圍內。

不用太擔心，這不是儀器壞了，絕大多數情況都可以通過以下步驟來排查和解決。

一、檢查關鍵數值與硬件

1、查看原始熒光值 (RFU)：在儀器上找到“Check Standards"或“Check Calibration"功能。

（1）對于核酸定量：標準品2 (Standard 2) 的熒光值，應至少是標準品1 (Standard 1) 的 10到50倍。

（2）對于蛋白定量：標準品3 (Standard 3) 的熒光值應約為標準品2 (Standard 2) 的 2倍。

（3）如果熒光值不滿足上述關系，說明標準品本身或配制過程可能有問題。

2、檢查儀器光源：打開儀器蓋子，運行一次校準，觀察樣品槽內是否有紅光或藍光閃爍5次。如果沒有，說明儀器光路可能存在問題，需要聯系售后。

二、檢查操作流程

1、確認標準品與樣本的配制：檢查是否嚴格按照說明書操作。例如，標準品通常需要將 10 µL 的標準品加入到 190 µL 的工作溶液中。同時，請確保標準品與樣品使用的是同一批工作液。

2、核對試劑盒與程序：確認儀器上選擇的程序與你所用的Qubit檢測試劑盒匹配。

3、檢查標準品與試劑盒有效期：Qubit試劑盒自收到之日起，通常穩定至少6個月。如果試劑盒已過期（比如超過一年），或懷疑RNA標準品降解，建議更換新的試劑盒。

4、檢查檢測管：確保使用的是光學透明的專用檢測管。同時，保證管外壁清潔干燥，且管內液體體積至少為200 µL。

三、排查環境與操作細節

1、溫度控制：Qubit檢測對溫度敏感。確保所有試劑（緩沖液、染料）和樣本都處于室溫（~25°C）。剛從4°C冰箱取出的緩沖液，即使在室溫放置2-3小時也可能仍未達到室溫。

2、避免樣本過熱：剛從離心機取出的樣本，或在儀器內放置過久、反復讀取的樣本，都可能因溫度升高導致信號減弱。如需多次讀取，應將檢測管取出，在室溫下平衡至少30秒再測。

3、檢查樣本濃度：查看原始熒光值，確認樣本的熒光值是否落在標準品的熒光值之間（或略高于最高標準品）。如果不在范圍內，儀器會提示“OUT OF RANGE"，此時需要對樣本進行稀釋或調整上樣體積。

4、交叉污染：Qubit檢測非常靈敏，即使是上一個樣本的微小殘留都可能導致錯誤。建議每次使用新的檢測管，并確保管外壁清潔干燥。